产品信息
1.分子别名
CD27LG, TNFSF7, TNFSF7G, CD27L.
2.表达区间及表达系统
FITC-Labeled Human CD70 Protein通过Expi293细胞表达,蛋白结构为:Human His-CD70, CD70对应的Human氨基酸序列为Ser52 – Pro193 (UniProt: P32970-1)。
3.偶联物
FITC.
4.纯度
>95%(根据SDS-PAGE结果分析)。
5.制剂
本产品经0.2µm滤器过滤,保存于PBS中,PH7.4。
6.运输
蓝冰运输。
7.存储
-20℃及以下。
8.应用
流式检测靶向CD70 CAR-T细胞表达。
产品验证
1.电泳-SDS-PAGE
图1.FITC-Labeled Human CD70 Protein经还原性SDS-PAGE胶考马斯亮蓝染色,结果显示该蛋白分子量在25KDa左右,蛋白纯度超过95%。
2.活性-FACS
图2. 分别取2×105个的T细胞和靶向CD70 CAR-T细胞,分别使用2µl FITC-Labeled Human CD70 Protein,按照标准流式方法染色并检测(FITC通道)。图左:T细胞,图右:靶向 CD70 CAR-T细胞。
使用方法
1.准备细胞样品。将细胞用移液枪充分吹打混匀,取2×105个细胞加入EP管。
2.细胞离心。向EP管中加入1ml FACS buffer,300g离心3分钟。
3.孵育。去除上清,加入100µl FACS buffer,然后加入2µl FITC-Labeled Human CD70 Protein,用移液枪吹打混匀,避光孵育30分钟。
4.细胞清洗。向孵育管中加入1ml FACS buffer,300g离心3分钟后,去除上清,用200µl FACS buffer重悬细胞沉淀。
5.上机检测。为获得最佳结果,尽快使用流式细胞仪分析细胞。
背景
CD70
CD70也称为TNFSF7, TNFSF7G,是一种二型跨膜糖蛋白,CD27分子的激活配体,属于肿瘤坏死因子超家族,其表达于人胸腺细胞、原生T细胞中,在激活的T细胞中表达上调,但当效应T细胞分化后表达减弱。此外CD70也在多种血液肿瘤和几种实体瘤中表达,使得其在免疫治疗中逐渐成为吸引力的靶点。