产品信息

1.分子别名
CLEC12A, MICL, DCAL-2, CD371.

2.表达区间及表达系统
FITC-Labeled Human CLL-1 Protein通过Expi293细胞表达，蛋白结构为：Human His-CLL-1，CLL-1对应的Human氨基酸序列为AA His 65-Ala 265 (UniProt: Q5QGZ9-2)，His标签在CLL-1的氨基端。

3.偶联物
FITC.

4.纯度
>95%（根据SDS-PAGE结果分析）。

5.制剂
本产品经0.2µm滤器过滤，保存于PBS中，PH7.4。

6.运输
蓝冰运输。

7.存储
-20℃及以下。

8.应用
流式检测靶向CLL-1 CAR-T细胞表达。

产品验证
1.电泳-SDS-PAGE

    图1.FITC-Labeled Human CLL-1 Protein经还原性SDS-PAGE胶考马斯亮蓝染色，结果显示该蛋白分子量在40KDa左右，蛋白纯度超过95%。

2.活性-FACS

    图2. 分别取2×10⁵个的293T细胞和靶向CLL-1 CAR-293T细胞，分别使用2µl FITC-Labeled Human CLL-1 Protein，按照标准流式方法染色并检测（FITC通道）。图左：293T细胞，图右：靶向 CLL-1 CAR-293T细胞。

    图3. 分别取2×10⁵个的T细胞和靶向CLL-1 CAR-T细胞，分别使用2µl FITC-Labeled Human CLL-1 Protein，按照标准流式方法染色并检测（FITC通道）。图左：T细胞，图右：靶向 CLL-1 CAR-T细胞。

使用方法
1.准备细胞样品。将细胞用移液枪充分吹打混匀，取2×10⁵个细胞加入EP管。
2.细胞离心。向EP管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟。
3.孵育。去除上清，加入100µl FACS buffer，然后加入2µl FITC-Labeled Human CLL-1 Protein，用移液枪吹打混匀，避光孵育30分钟。
4.细胞清洗。向孵育管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟后，去除上清，用200µl FACS buffer重悬细胞沉淀。
5.上机检测。为获得最佳结果，尽快使用流式细胞仪分析细胞。

背景
CLL-1
CLL-1也称为C型凝集素结构域家族12成员A(CLEC12A)、骨髓抑制C型凝集素样受体(MICL)、树突状细胞相关C型凝集素2 (DCAL-2) 或者CD371。CLL-1 属于C型凝集素样受体家族V组成员，该蛋白有一个胞外结合结构域（结构域含有6个N糖基化位点），一个中间跨膜结构域，一个胞内结构域（该结构域氨基端含有两个保守序列，分别为I/VXYXXL、YXXM）组成。2004年，bakker等人，使用噬菌体展示技术首次鉴定了C型凝集素样分子1（CLL-1），主要在AML和白血病干细胞中表达，但在粒巨祖细胞和非血液组织无表达。由于白血病干细胞可以产生大量特异表达CLL-1, CD123, CD44, CD96, CD90, CD32, CD25, TIM-3的细胞，其成为白血病复发方面非常重要的因素。因此CLL-1也成为理想的治疗急性髓系白血病的药物靶点。