产品信息

1.产品别称
抗CD3/CD28抗体偶联磁珠。

2.产品介绍
本产品通过在5.5μm磁珠上结合抗人CD3、CD28单克隆抗体制备而成，可直接用于T细胞激活和扩增。经过多次试验验证，可高效激活T细胞，激活效果稳定可靠，传代培养10天可扩增960倍，活率在95%以上。

3.浓度及含量
500μl磁珠悬液，共包含1×10⁸个磁珠。

4.无菌检测及内毒素检测
本产品通过无菌检查且LAL法检测内毒素含量低于2EU/ml。

5.运输
蓝冰运输。

6.储存
2-8℃保存。

7.应用
用于T淋巴细胞体外激活、扩增。仅供研究使用。

产品验证
1.活性-FACS

    图1.本产品可高效激活T细胞。分别用CTS™ Dynabeads™ CD3/CD28 (Thermo Fisher)和本产品激活PBMC中的T细胞，磁珠与T细胞的数量比为1：1，激活48小时后用CD25-PE及CD69-APC进行染色。图左：Thermo Fisher，图右：本产品 (JADEBIOSCI)。

2.活性-Transfection

图2.本本产品激活的T细胞可高效感染慢病毒。分别用CTS™ Dynabeads™ CD3/CD28 (Thermo Fisher)和本产品激活PBMC中的T细胞，激活24小时后感染Anti-BCMA(human) CAR lentivirus（JADEBIOSCI CA22007），感染后48小时后用FITC-Labled Human BCMA Protein（JADEBIOSCI CA22003）进行染色。图左：Thermo Fisher，图右：本产品 (JADEBIOSCI)。

3.活性-Expansion  

    3.激活的T细胞可高效扩增。PBMC中T细胞用本产品激活后，在含有10ng/ml IL-2的T细胞完全培养基中连续传代培养10天。图A：激活的T细胞扩增对比，图B：T细胞活率对比。

使用方法
1、细胞准备。从血液样品中分离单个核细胞（PBMC），并测定CD3+比例，估算T细胞总量，取出确定数量的T细胞，300g离心5分钟，弃上清，沉淀用含有10ng/ml IL-2的T细胞完全培养基重悬，调整细胞密度为1×10⁶/ml。

2、磁珠清洗。将磁珠混合均匀，上下颠倒5分钟，或者涡旋30秒，取出确定数目的磁珠（磁珠与T细胞数量比为1：1），加入清洗缓冲液并吹打混匀。清洗缓冲液为含1% HSA（人血清白蛋白）的PBS溶液，或含1% FBS（胎牛血清）的PBS溶液，将离心管放在磁力架上静置2分钟，吸去上清液。

3、细胞激活。用细胞悬液重悬磁珠，转入细胞培养板，吹打混匀后，置于37℃，5%CO₂培养箱静置培养。

4、去除磁珠。激活48至72小时后，将细胞吹打混匀使磁珠和细胞分散，后加入离心管，置于磁力架上2分钟，吸出上清，即为激活的T细胞溶液。

背景
在人体内，T细胞受体（TCR）特异性识别MHC-抗原肽复合物，导致T细胞激活。同时T细胞表面CD28分子和抗原递呈细胞表面蛋白B7结合，辅助T细胞激活。在体外，结合了抗人CD3/CD28单克隆抗体的磁珠模拟上述过程，激活T淋巴细胞，激活的T细胞成为效应T细胞，可用于制造CAR-T、TCR-T等免疫治疗产品。