产品信息

1.分子别名
SIGLEC3, gp67.

2.表达区间及表达系统
FITC-Labeled Human CD33 Protein通过Expi293细胞表达，蛋白结构为：Human CD33-IgG1 Fc，IgG1 Fc 对应的氨基酸序列为Pro100 - Lys330 (UniProt: P01857)，对应的Human CD33氨基酸序列为Asp18 – His259 (UniProt: AAH28152.1)。

3.偶联物
FITC.

4.纯度
>95%（根据SDS-PAGE结果分析）。

5.制剂
本产品经0.2µm滤器过滤，保存于PBS中，PH7.4。

6.运输
蓝冰运输。

7.存储
-20℃及以下。

8.应用
流式检测靶向CD33 CAR-T细胞表达。

产品验证
1.电泳-SDS-PAGE

    图1.FITC-Labeled Human CD33 Protein经还原性SDS-PAGE胶考马斯亮蓝染色结果显示，蛋白分子量在70KDa左右，蛋白纯度超过95%。

2.活性-FACS

    图2. 分别取2×10⁵个的T细胞和靶向CD33 CAR-T细胞，分别使用2µl FITC-Labeled Human CD33 Protein，按照标准流式方法染色并检测（FITC通道）。图左：T细胞，图右：靶向 CD33 CAR-T细胞。

图3. 分别取2×10⁵个的293T细胞和靶向CD33 CAR-293T细胞，分别使用2µl FITC-Labeled Human CD33 Protein，按照标准流式方法染色并检测（FITC通道）。图左：293T细胞，图右：靶向 CD33 CAR-293T细胞。

使用方法
1.准备细胞样品。将细胞用移液枪充分吹打混匀，取2×10⁵个细胞加入EP管。
2.细胞离心。向EP管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟。
3.抗体孵育。加入100µl FACS buffer，然后加入2µl FITC-Labeled Human CD33 Protein，用移液枪吹打混匀，避光孵育30分钟。
4.细胞清洗。向孵育管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟后，去除上清，用200µl FACS buffer重悬细胞沉淀。
5.上机检测。为获得最佳结果，尽快使用流式细胞仪分析细胞。

背景
CD33
CD33是髓系细胞谱系的一种早期表面抗原，分子量67KD，为I型跨膜蛋白，也称为唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素（SIGLEC3）、GP67，属于免疫球蛋白超家族和唾液酸结合免疫球蛋白样凝集素家族。免疫球蛋白人 CD33 优先结合α-2,6-连接唾液酸，与其配体结合后被激活，可通过其细胞内结构域中的免疫受体酪氨酸抑制基序 (ITIM) 引发一种抑制信号转导，抑制吞噬等细胞功能。此外，CD33 还参与其他调节功能，例如调节细胞内钙动员、细胞粘附、白血病细胞凋亡、髓系细胞成熟和细胞因子的产生等。由于其在造血细胞（尤其是髓系谱系及其祖细胞）上的独特表达，CD33 被作为一种治疗急性髓系白血病 (AML) 的靶标。