产品信息

1.分子别名

OCI5, Glypican-3, GTR2-2, MXR7.

2.表达区间及表达系统
FITC-Labeled Human GPC3 Protein通过Expi293细胞表达，蛋白结构为：Human GPC3 -His，对应的Human GPC3氨基酸序列为AA Gln 25 - His 559 (UniProt: P51654-1)。 

3.偶联物
FITC.

4.纯度
>90%（根据SDS-PAGE结果分析）。

5.制剂
本产品经0.2µm滤器过滤，保存于PBS中，PH7.4。

6.运输
蓝冰运输。

7.存储
-20℃及以下。

8.应用
流式检测靶向GPC3 CAR-T细胞表达。

产品验证
1.电泳-SDS-PAGE

图1. FITC-Labeled Human GPC3 Protein跑还原性SDS-PAGE胶后考马斯亮蓝染色，根据该结果显示蛋白纯度至少超过90%。

2.活性-FACS

图2. 取2×10⁵个的T细胞和靶向GPC3 CAR-T细胞，分别使用2µl FITC-Labeled Human GPC3 Protein，按照标准流式方法染色并检测（FITC通道）。图左：T细胞，图右：靶向 GPC3 CAR-T细胞。

使用方法
1.准备细胞样品。将细胞用移液枪充分吹打混匀，取2×10⁵个细胞加入EP管。
2.细胞离心。向EP管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟。
3.抗体孵育。去除上清，加入100µl FACS buffer，然后加入2µl FITC-Labeled Human GPC3 Protein，用移液枪吹打混匀，避光孵育30分钟。
4.细胞清洗。向抗体孵育管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟后，去除上清，用200µl FACS buffer重悬细胞沉淀。
5.上机检测。为获得最佳结果，尽快使用流式细胞仪分析细胞。

背景
GPC3
GPC3全称Glypican-3，由580个氨基酸组成，分子量为65KD, 是硫酸乙酰肝素蛋白聚糖家族的成员，其通过细胞膜上的糖基磷脂酰肌醇锚定连接于细胞表面。该蛋白质在健康胎儿的肝肾中表达，但是在正常成人中除了胎盘，其他器官表达极少或无表达。然而在肝细胞癌、卵巢透明细胞癌、黑色素瘤、鳞状细胞肺癌、肝母细胞瘤、肾母细胞瘤、卵黄囊瘤、以及一些小儿癌症中特异性表达，尤其是在肝细胞癌中高表达。近年研究表明 Glypican-3 将成为诊断和免疫治疗肝细胞癌的一个重要的候选靶点，许多基于该靶点的不同免疫治疗技术也不断出现，如GPC3 疫苗、抗GPC3免疫毒素、嵌合抗原受体修饰细胞等。