产品信息
1.分子别名
CD7, GP40, TP41, Tp40, LEU-9.
2.表达区间及表达系统
FITC-Labeled Human CD7 Protein通过Expi293细胞表达,蛋白结构为:Human Llama IgG2b FC- CD7,Llama IgG2b FC 对应的氨基酸序列为Glu1-Ser243(AAX73259.1),CD7对应的Human氨基酸序列为Ala26–Pro180 (UniProt: P09564-1)。
3.偶联物
FITC.
4.纯度
>95%(根据SDS-PAGE结果分析)。
5.制剂
本产品经0.2µm滤器过滤,保存于PBS中,PH7.4。
6.运输
蓝冰运输。
7.存储
-20℃及以下。
8.应用
流式检测靶向CD7 CAR-T细胞表达。
产品验证
1.电泳-SDS-PAGE
图1. FITC-Labeled Human CD7 Protein跑还原性SDS-PAGE胶后考马斯亮蓝染色,根据该结果显示蛋白纯度至少超过95%。
2.活性-FACS
图2. 分别取2×105个的T细胞和靶向CD7 CAR-T细胞,分别使用2µl FITC-Labeled Human CD7 Protein,按照标准流式方法染色并检测(FITC通道)。图左:T细胞,图右:靶向 CD7 CAR-T细胞。
使用方法
1.准备细胞样品。将细胞用移液枪充分吹打混匀,取2×105个细胞加入EP管。
2.细胞离心。向EP管中加入1ml FACS buffer,300g离心3分钟。
3.孵育。去除上清,加入100µl FACS buffer,然后加入2µl FITC-Labeled Human CD7 Protein,用移液枪吹打混匀,避光孵育30分钟。
4.细胞清洗。向孵育管中加入1ml FACS buffer,300g离心3分钟后,去除上清,用200µl FACS buffer重悬细胞沉淀。
5.上机检测。为获得最佳结果,尽快使用流式细胞仪分析细胞。
背景
CD7
CD7属于免疫球蛋白超家族成员,是一种40KD的I型跨膜糖蛋白。CD7作为T细胞以及自然杀伤细胞谱系的一种早期表面抗原,主要表达在胸腺细胞、绝大多数T细胞、自然杀伤细胞以及其前体细胞表面,但是依然有少部分外周血T细胞以及自然杀伤细胞不表达CD7。另外,CD7也表达于B细胞和髓样细胞发育的早期。另外小鼠实验表明T祖细胞中的CD7基因敲除后并不影响小鼠T细胞的正常发育进程,并且小鼠机体内环境依然保持稳定,仅仅是小鼠T细胞效应器功能的发挥受到了轻微的影响,这说明 CD7分子在T细胞发育和T细胞发挥免疫功能方面似乎并没有起到关键性的作用。目前大量的研究发现CD7与血液系统肿瘤的发生发展密切相关。在多数人急性T淋巴细胞白血病(T-ALL),T细胞淋巴瘤和部分亚型的急性髓细胞白血病肿瘤细胞上均有CD7抗原异常高表达现象的存在,CD7分子的表达与疾病侵袭性、耐药性和不良预后有着密切的关系。CD7分子作为T细胞系血液肿瘤特异且敏感的抗原指标之一,普遍认为CD7是T-ALL及CD7阳性肿瘤的一个理想靶点。除此之外,CD7分子还与HIV感染、类风湿关节炎的发生有密切关系,应用前景广阔。
CD7抗原作为一种标志物已被广泛应用于流式细胞术检测中,常用荧光染料如FITC异硫氰酸荧光素,呈现明亮的黄绿色荧光,通过与蛋白自由氨基结合,形成蛋白与荧光素的结合物,标记蛋白质高效且稳定,可以用于评估靶向抗体在细胞环境中的表达情况。