产品信息
1.产品别名
4×Lentivirus Concentrator Solution;慢病毒浓缩液。
2.产品介绍
4×Lentivirus Concentrator Solution是一种无需超高速离心,简单快速且高效浓缩慢病毒上清液的试剂,病毒回收率大于90%。
3.制剂
无菌溶液。
4.运输
蓝冰运输。
5.存储
4℃保存。
6.应用
(1)慢病毒浓缩。
(2)腺相关病毒浓缩(仅限上清部分)。
产品验证
1.活性-FACS
图1. 按照慢病毒(表达GFP蛋白)上清液:病毒浓缩液 3:1,将两者混合均匀,然后置于4℃孵育4小时,低速离心弃上清后添加原病毒上清液体积的1/100 培养基重悬沉淀,然后将该浓缩病毒液稀释1000倍、浓缩前的病毒上清液稀释10倍分别感染293T,48小时后流式检测,结果显示:病毒浓缩回收率为91%。图左:未感染293T细胞,图中:浓缩前上清液稀释10倍感染,图右:浓缩后稀释1000倍感染。
使用方法
1.将慢病毒包装后收取的慢病毒上清液500g, 离心10分钟去除细胞碎片,然后将上清液转移上清到一个新的合适容量的无菌离心管中,与本浓缩试剂按照3:1充分混合。
2.4℃孵育至少一个小时,过夜孵育效果最好。
3.2000g离心1.5小时,然后去除上清。
4.加入原病毒上清液体积的1/10至1/100溶液(PBS或者培养基)重悬病毒沉淀。
5.根据实际需求,分装浓缩后的病毒,后置于-80℃保存。
背景
慢病毒浓缩
慢病毒载体在基因与细胞治疗领域起到非常重要的作用,对高滴度的慢病毒颗粒需求也越来越多。目前关于慢病毒的浓缩常用的方法有超速离心法、沉淀法、蔗糖梯度离心法、离子交换色谱法和超滤法,其中除沉淀法对对设备的要求较低,操作方便外,其他方法浓缩富集慢病毒往往需要大型设备(如超速离心机、AKTA纯化仪等),而且操作繁琐耗时,对于实验室配置设备不足或者仅仅用于非临床小规模转染需求的研究者来说,基于沉淀法浓缩慢病毒的4×Lentivirus Concentrator Solution慢病毒浓缩液不但经济,而且方便高效,有利于快速推动实验的开展。