产品信息

1.分子别名
TNFRSF17, CD269, BCM, BCMA.

2.表达区间及表达系统
FITC-Labeled Human BCMA Protein通过Expi293细胞表达，蛋白结构为：Human BCMA-IgG1 FC，对应的Human BCMA氨基酸序列为AA Met 1–Ala54 (UniProt: Q02223-1)。

3.偶联物
FITC.

4.纯度
>90%（根据SDS-PAGE结果分析）。

5.制剂
本产品经0.45µm滤器过滤，保存于PBS中，PH7.4。

6.运输
蓝冰运输。

7.存储
-20℃及以下。

8.应用
流式检测靶向BCMA CAR-T细胞表达。

产品验证
1.电泳-SDS-PAGE

图1. FITC-Labeled Human BCMA Protein跑还原性SDS-PAGE胶后考马斯亮蓝染色，根据该结果显示蛋白纯度至少超过90%。

2.活性-FACS

图2. 分别取2×10⁵个的T细胞和靶向BCMA CAR-T细胞，分别使用1µl FITC-Labeled Human BCMA Protein，按照标准流式方法染色并检测（FITC通道）。图左：T细胞，图右：靶向BCMA CAR-T细胞。

使用方法
1.准备细胞样品。将细胞用移液枪充分吹打混匀，取2×10⁵个细胞加入EP管。
2.细胞离心。向EP管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟。
3.孵育。去除上清，加入100µl FACS buffer，然后加入2µl FITC-Labeled Human BCMA Protein，用移液枪吹打混匀，避光孵育30分钟。
4.细胞清洗。向孵育管中加入1ml FACS buffer，300g离心3分钟后，去除上清，用200µl FACS buffer重悬细胞沉淀。
5.上机检测。为获得最佳结果，尽快使用流式细胞仪分析细胞。

背景
BCMA
B细胞成熟抗原（BCMA），又名TNFRSF17或CD269，属于缺少信号肽的Ⅲ型跨膜受体蛋白，是肿瘤坏死因子受体超家族成员，于20世纪90年代初首次被发现。在正常组织中，BCMA表达于成熟B细胞和浆细胞表面，其表达量随着B细胞的发育成熟而逐渐增加，研究者们指出BCMA分子还在霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、胶质母细胞瘤等恶性肿瘤中均存在异常高表达的现象。Kochenderfer等在已有报道的基础上，又联合应用Q-PCR、Flow Cytometry和免疫组化方法深入研究了BCMA的表达特征，确认BCMA在成熟B细胞、浆细胞之外的正常人体组织无表达，且在CD34+造血细胞中也无表达。综上所述，BCMA分子可作为免疫治疗的理想靶点。目前围绕该靶点已经开发出多种靶向治疗方法，主要分为三种类型：双特异性抗体(如BiTE分子)、抗体药物偶联物(ADCs)、CAR T 细胞治疗。BCMA抗原作为一种标志物已被广泛应用于以上检测中，其中应用于流式细胞检测中常用的试剂为荧光染料标记的BCMA， 如FITC异硫氰酸荧光素，呈现明亮的黄绿色荧光，通过与蛋白自由氨基结合，形成蛋白与荧光素的结合物，标记蛋白质高效且稳定，可以用于评估靶向抗体在细胞环境中的表达情况。