产品信息
1.产品全称
Serum-Free and Xeno-Free, Defined Cryopreservation Medium with 10% DMSO.
2.产品介绍
SF/XF-10是一款无血清/无异源蛋白且化学成分明确的细胞冻存液,含10% DMSO,在超低温环境(-80至-196°C)中为细胞和组织提供安全的保护环境,避免对细胞器和细胞膜的损害。本冻存液可调节细胞对低温储存工艺的生化反应,增强解冻后细胞增殖活力,建议用于各种免疫细胞,尤其是T细胞的保存。
3.产品优势
(1)细胞复融后,细胞生长速度和活率比同类金标准产品CryoStor® CS10更优。
(2)特别适合免疫细胞的冻存。
(3)无血清/无异源蛋白,更符合临床细胞冻存需求。
4.制剂
本产品经0.22µm滤器过滤,为无菌制剂。
5.运输
蓝冰运输。
6.存储
2-8℃保存。
7.应用
主要用于免疫细胞冻存(特别是T细胞)。
产品验证
1.冻存后复融对细胞活率的影响
图1. 取1×107个T细胞分别用本冻存液(SF/XF-10)和CryoStor® CS10冻存液混悬,后冻存于-80℃冰箱中。复融后,将细胞加入到等体积培养基中培养,在不同天数使用台盼蓝计数细胞浓度和活率,细胞活率结果如上图所示,使用本冻存液,细胞复融后可保持高活率生长。
2.冻存后复融对细胞生长速度的影响
图2. 取1×107个T细胞分别用本冻存液(SF/XF-10)和CryoStor® CS10冻存液混悬,后冻存于-80℃冰箱中。复融后,将细胞加入到等体积培养基中培养,在不同天数使用台盼蓝计数细胞浓度和活率,细胞扩增结果如上图所示,使用本冻存液,细胞复融后可保持高速度生长。
使用方法
1.将待冻存细胞悬液300g离心5分钟后去除上清。
2.加入预冷的冻存液(通常细胞密度调整为0.5-10×106/mL)并混匀。
3.将细胞与冻存液的混合液置于4℃静置10分钟。
4.使用程序降温法冷冻细胞,放置-80℃冰箱或液氮中保存。
5.使用37°C水浴快速解冻细胞,解冻后立即用大于10倍体积培养基稀释细胞冻存液混合物,放置37°C培养箱中培养。
背景
细胞冻存液
细胞在超低温冷冻保存过程中冻存液可减少冰晶损伤从而有效保护细胞。随着细胞治疗在临床上的广泛应用,细胞制品保存面临巨大的挑战,首先,原代细胞(包括免疫细胞和干细胞)的冷冻保存仍无法获得足够高活率和高活力,其次,由于细胞产品需伴随细胞冻存液一并回输患者体内,细胞冻存液必须保证无致敏和毒性成分。然而传统的细胞冻存液含有血清或异源蛋白成分,这些成分虽然可以作为细胞的一种营养物质,但由于批次差异及成分复杂等因素对细胞可能有不确定性的影响,因而无法适应临床要求。另外传统的细胞冻存液不能调节细胞在冻存条件下的应激反应,通常复融后活率和活力都会受到较大影响。SF/XF-10细胞冻存液是为满足细胞治疗的特殊要求而设计开发,其具有无血清、细胞复融后高活率和高活力、易使用等特点。